加热会使蛋白质变性,在变性过程中肽键是否因此而断裂呢?
请设计一个验证“蛋白质在加热变性后肽键没有断裂”的实验。
材料、用具:0.1g/mL的NaOH溶液(双缩脲试剂A)、0.01g/mL的 CuS04溶液(双缩脲试剂B)、蛋清、清水、酒精灯、试管、滴管等必备用品。
(1)实验原理:蛋白质中的肽键与双缩脲试剂发生颜色反应,呈紫色。如果加热变性的蛋白质与双缩脲试剂反应仍呈紫色,即可证明肽键没有断裂。
(2)方法步骤:
①取两支试管,分别编号为A、B,向两支试管中加入________________。
②对A试管______,使蛋清液变性,B试管______。
③冷却后,分别向两支试管________________,摇匀,再向两支试管分别_____________________,摇匀。
④观察两试管的颜色变化。
(3)预期结果:_____________________。
(4)实验结论:蛋白质在加热变性后肽键没有断裂。
【答案】等量(或2mL)的蛋清液加热不加热1mL0.1g/mL 的NaOH溶液滴入4滴0.01g/mL的CuSO4溶液A、B试管均变紫
【解析】实验设计原则是单一变量原则、对照原则。已知该实验自变量是加热变性情况,所以一组加热一组不加热,其他条件都保证相同,蛋白质鉴定过程要注意双缩脲试剂的使用顺序,最后通过颜色反应比较两个试管的变化并得出结论。
根据题目可知该实验自变量是“是否进行加热处理”,故一组加热处理、另一组不进行加热处理,其它处理相同。所以(2)方法步骤为:①取两支试管,分别编号A、B,向两支试管中加入等量的蛋清液(对照原则);②对A试管加热,使蛋清变性,B试管不加热(单一变量原则);③根据双缩脲试剂使用方法,分别向两支试管先加入1mL0.1g/mL 的NaOH溶液,再滴入4滴0.01g/mL的CuSO4溶液。(3)预期结果是蛋白质在加热变性后肽键没有断裂,因此预期结果是A、B试管均变紫